Homeofarm – Bulk Biotech Lab Suppliers

Od jesieni 2020 r. w kilku krajach wdrożono szybkie testy antygenowe (RAT) jako ważny filar krajowej strategii testowania w celu szybkiego badania przesiewowego pod kątem infekcji na miejscu podczas pandemii SARS-CoV-2. Obecny wzrost liczby infekcji na całym świecie jest napędzany przez wariant omikron (VoC) (B.1.1.529). Tutaj oceniliśmy działanie dziewięciu RAT SARS-CoV-2 w jednoośrodkowym badaniu laboratoryjnym.

Przebadaliśmy łącznie 115 próbek wymazów z dróg oddechowych SARS-CoV-2 ujemnych pod względem PCR i 166 próbek wymazów z dróg oddechowych SARS-CoV-2 dodatnich pod względem PCR (101 omikronów, 65 delta (B.1.617.2)) pobranych od października 2021 r. do stycznia 2022 r. jako ekspandowane przez hodowlę komórkową kliniczne izolaty obu VOC. W ocenie czułości analitycznej w próbce klinicznej 50% granica wykrywalności (LoD50) wahała się od 1,77 × 10 ^6 do  7,03 × 107  kopii RNA poddanych RAT dla omikronu w porównaniu z 1,32 × 105 ^do  2,05 × 10 ⁶  dla delty.

Aby uzyskać pozytywny wynik w tych testach przyłóżkowych, wymagane było 10-krotnie (LoD50) lub 101-krotnie (LoD95) wyższe obciążenie wirusem w przypadku próbek zawierających omikron w porównaniu z próbkami zawierającymi delta.

Odsetek prawdziwie pozytywnych wyników testu dla próbek omikronowych w najwyższej kategorii obciążenia wirusem (wartości Ct < 25) wahał się między 31,4 a 77,8%, podczas gdy spadł do 0-8,3% dla próbek o pośrednich wartościach Ct (25-30). Warto zauważyć, że testowanie rozszerzonych zasobów wirusów sugerowało porównywalną wrażliwość obu VoC na RAT, kwestionując wartość predykcyjną tego typu badań in vitro dla wydajności klinicznej. Biorąc pod uwagę ich znaczenie dla krajowych strategii testowych w obecnej fali omikronowej, należy zwiększyć świadomość zmniejszonego wskaźnika wykrywalności zakażeń omikronowych przez RAT i szybko ujawnić krótką listę odpowiednich RAT, które spełniają minimalne wymagania wydajności.

• Szybki test diagnostyczny oparty na antygenie (Ag-RDT) z wykorzystaniem próbek śliny jest szybki, nieinwazyjny i odpowiedni do samodzielnego testowania SARS-CoV-2, w przeciwieństwie do badania wymazu z nosogardzieli (NPS).
• Oceniliśmy nowatorską metodę zbierania wirusów opartą na płukaniu Beanguard (BG), którą można zastosować do Ag-RDT jako alternatywę dla obecnej RT-PCR z NPS do wczesnej diagnozy COVID-19. To badanie kliniczne objęło 102 pacjentów zakażonych COVID-19 hospitalizowanych po rządowym procesie przesiewowym i 100 zdrowych osób.
• Pary próbek śliny NPS i BG od pacjentów z COVID-19 i osób zdrowych przeanalizowano za pomocą NPS-RT-PCR, BG-RT-PCR i BG-Ag-RDT, których skuteczność diagnostyczna w wykrywaniu SARS-CoV-2 została porównana . Testy BG-Ag-RDT wykazały wysoką czułość (97,8%) i swoistość (100%) u 45 pacjentów w ciągu 6 dni od choroby i wykryły wszystkie przypadki wariantów SARS-CoV-2 Alpha i Delta.
• W 11 bezobjawowych aktywnych przypadkach COVID-19 zarówno BG-Ag-RDT, jak i BG-RT-PCR wykazały 100% czułość i swoistość. Czułość BG-Ag-RDT i BG-RT-PCR na wykrywanie wirusa w ślinie była bardzo zgodna, bez rozróżnienia między przypadkami objawowymi (97,0%), bezobjawowymi (100%) lub SARS-CoV-2 (100%).
• Interakcje międzycząsteczkowe między białkami szczytowymi SARS-CoV-2 a skróconą kanawaliną, substancją czynną ekstraktu z fasoli (BE), zaobserwowano pod względem właściwości fizykochemicznych. Odłączenie domeny wiążącej receptor SARS-CoV-2 od hACE2 wzrastało wraz ze wzrostem stężenia BE, umożliwiając uwolnienie wirusa z hACE2 w celu wczesnej diagnozy.
• Korzystanie z próbek śliny opartych na BG znacznie poprawia wydajność diagnostyczną Ag-RDT jako alternatywę dla NPS i umożliwia nieinwazyjne, szybkie i dokładne samotestowanie COVID-19 oraz masowe badania przesiewowe, wspierając skuteczne zarządzanie COVID-19.

 ZNACZENIE

Jest mniej prawdopodobne, że Ag-RDT zostanie zaakceptowana jako wstępna metoda badawcza do wczesnej diagnozy ze względu na jej niską czułość. Jednak nasza metoda samodzielnego pobierania, Ag-RDT przy użyciu próbek śliny z BG, wykazała znacznie zwiększoną czułość i swoistość wykrywania wobec SARS-CoV-2, w tym wariantów alfa i Delta u wszystkich pacjentów przebadanych w ciągu 6 dni od choroby. Metoda stanowi atrakcyjną alternatywę dla wymazów z nosogardzieli we wczesnej diagnostyce objawowych i bezobjawowych przypadków COVID-19. Dowody sugerują, że metoda może mieć potencjał do masowych badań przesiewowych i monitorowania przypadków COVID-19.

Pandemia SARS-CoV-2, która rozpoczęła się w grudniu 2019 r., stanowi poważne wyzwanie dla systemu opieki zdrowotnej na całym świecie.

Ponieważ pandemia rozprzestrzenia się z szybko rosnącą liczbą pozytywnych przypadków, wczesna diagnoza zakażonych pacjentów ma kluczowe znaczenie dla skutecznego ograniczenia rozprzestrzeniania się wirusa. Chociaż reakcja łańcuchowa polimerazy z odwrotną transkrypcją w czasie rzeczywistym (RT-qPCR) jest zalecaną metodą laboratoryjną do diagnozowania zakażenia COVID-19, wiele czynników, takich jak dostępność sprzętu laboratoryjnego, odczynników i przeszkolonego personelu, wpływa na stosowanie czasochłonnych technik molekularnych .

Aby ułatwić diagnostykę COVID-19 na miejscu, kilku różnych producentów opracowało szybkie testy antygenowe SARS-CoV-2. Ocena takich szybkich testów jest szczególnie ważna ze względu na niedawne jednomyślne porozumienie państw członkowskich Komisji Europejskiej w sprawie zalecenia określającego ramy stosowania szybkich testów antygenowychktóra zawiera listę wzajemnie uznanych testów oraz podstawę niezależnych protokołów walidacji. Ocena wydajności w terenie dziesięciu dostępnych na rynku szybkich testów na obecność antygenu SARS-CoV-2 (CLINITEST Rapid COVID-19 Antigen Test, GenBody COVID-19 Antigen Test, GENEDIA W COVID-19 Ag Test, Healgen Coronavirus Antigen Antigen Test, Humasis COVID-19 Ag Test, VivaDiag SARS-CoV-2 Ag Rapid Test, Helix i-SARS-CoV-2 Ag Rapid Test, Roche SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test, Abbot COVID-19 Ag Rapid Test i Vazyme SARS-CoV -2 zestaw wykrywania antygenu) i porównaj z RT-qPCR jako metodą referencyjną, węgierskie Narodowe Centrum Zdrowia Publicznego dostarczyło Narodowej Służbie Pogotowia Ratunkowego 1597 szybkich testów antygenu, ciężarówkom do testowania COVID i dwóm szpitalom leczącym pacjentów z COVID-19.

Czułość, swoistość i dokładność określono wykonując szybki test bezpośrednio z wymazów z nosogardzieli osób z objawami. Dla próbek silnie dodatnich (Ct < 25) czułość wahała się od 66,7% do 100%, natomiast dla próbek dodatnich (Ct < 30) dały maksymalną czułość 87,5%. Specyficzność testów wahała się od 79% do 100%. Przedstawione tutaj wyniki mają duże znaczenie dla Komisji Europejskiej, a także pomagają rządowi w podejmowaniu decyzji dotyczących stosowania odpowiednich szybkich testów do badań przesiewowych różnych populacji ryzyka. Niemniej jednak szybkie testy SARS-Cov-2 odgrywają ważną rolę we wczesnej i na miejscu diagnozy potencjalnie zakażonych osób.