Wirusy grypy stanowią ogromne zagrożenie dla zdrowia publicznego i przemysłu zwierzęcego. Opracowane szczepionki są szeroko stosowane w celu zmniejszenia ryzyka potencjalnej pandemii; jednak trwający dryf antygenowy sprawia, że wirus grypy ucieka przed odpowiedzią immunologiczną gospodarza i hamuje skuteczność szczepionki. Do tej pory genetyczne podstawy zmienności antygenowej pozostają w dużej mierze nieznane.
W tym badaniu wykorzystaliśmy A/swine/Guangxi/18/2011 (GX/18) i A/swine/Guangdong/104/2013 (GD/104) jako modele do zbadania molekularnej determinanty zmienności antygenowej eurazjatyckiego ptasiego H1N1 (EA H1N1) wirusy świńskiej grypy (SIV) i stwierdzono, że wirus GD/104 wykazywał 32∼64-krotnie niższą antygenową reaktywność krzyżową z przeciwciałami przeciwko wirusowi GX/18. Dlatego wytworzyliśmy przeciwciała poliklonalne przeciwko wirusowi GX/18 lub GD/104 oraz przeciwciało monoklonalne (mAb), nazwane mAb102-95, ukierunkowane na białko hemaglutyniny (HA) wirusa GX/18 i odkryliśmy, że pojedyncze podstawienie aminokwasu w pozycji 158 w białku HA zasadniczo zmienił antygenowość wirusa.
Reaktywność wirusa GX/18 zawierającego mutację G158E z mAb102-95 zmniejszyła się 8-krotnie niż w przypadku szczepu rodzicielskiego.
Przeciwnie, reaktywność wirusa GD/104 niosącego mutację E158G z mAb102-95 wzrosła 32-krotnie w porównaniu z wirusem rodzicielskim. Analiza strukturalna wykazała, że mutacji aminokwasu z G na E towarzyszyła zmiana grupy R z -H na -(CH2 ) 2 – COOH.
- Indukowany efekt steryczny i zwiększona hydrofilowość powierzchni białka HA prawdopodobnie łącznie przyczyniły się do dryfu antygenowego SIV EA H1N1.
- Nasze badanie dostarcza eksperymentalnych dowodów na to, że mutacja G158E w białku HA wpływa na właściwości antygenowe SIV EA H1N1 i poszerza horyzont dryfu antygenowego wirusa grypy. Ten artykuł jest chroniony prawem autorskim. Wszelkie prawa zastrzeżone.
- To badanie miało na celu ocenę korelacji odpowiedzi immunologicznej i ochrony przed zakażeniem wirusem grypy (IV) u świń zaszczepionych nowym kandydatem na szczepionkę NG34 HA1 z adiuwantem CAF<sup> </sup>01 lub CDA/αGalCerMPEG (αGCM).
- Dwie grupy po sześć świń każda zostały zaszczepione domięśniowo dwukrotnie albo NG34 + CAF<sup> </sup>01 lub NG34 + CDA/αGCM. Jako kontrole do badania włączono grupy zwierząt (<i>n</i> = 6 lub 4) nieszczepione lub zaszczepione ludzką trójwalentną szczepionką przeciw grypie sezonowej lub NG34 + adiuwant Freunda.
- Wszystkie grupy zwierząt poddano prowokacji pandemicznym (pdm09) szczepem H1N1 z 2009 r. (całkowita ilość 7 × 10<sup>6</sup>TCID<sub>50</sub>/ml) drogą donosową i dotchawiczą 21 dni po drugie szczepienie. Zmniejszone skonsolidowane zmiany w płucach obserwowano zarówno w trzecim, jak i siódmym dniu po prowokacji u zwierząt zaszczepionych NG34 + CAF<sup> </sup>01, podczas gdy większą zmienność ze stosunkowo cięższymi zmianami u świń z grupy NG34 + CDA/αGCM trzeciego dnia po zakażeniu.
- Wśród grup zwierzęta szczepione NG34 + CDA/αGCM wykazywały wyższe miano wirusa w płucach siedem dni po zakażeniu, podczas gdy zwierzęta szczepione NG34 + CAF<sup> </sup>01 całkowicie zniosły wirusa z dolnych dróg oddechowych.
- Podobnie, wyższe wydzielanie IFNγ i silniejsze odpowiedzi IgG przeciwko peptydowi NG34 w surowicy zaobserwowano u zwierząt z grupy NG34 + CAF<sup></sup>01 w porównaniu do NG34 + CDA/αGCM. Świnie szczepione NG34 kombinacją CAF<sup></sup>01 lub CDA/αGCM z adiuwantem powodowały różne odpowiedzi immunologiczne, a także wyniki w patologii i wydalaniu wirusa.
W 2009 roku nowy szczep wirusa grypy A H1N1 wywołał pandemię, a jego potomne szczepy wywołują sezonowe epidemie na całym świecie.
Biorąc pod uwagę wysokie tempo mutacji wirusów grypy, stale pojawiają się warianty szczepów o różnych aminokwasach na hemaglutyninie (HA).Aby przygotować szczepy szczepionkowe na kolejne sezony grypowe, pilnym zadaniem jest przewidzenie, które warianty zostaną wyselekcjonowane w populacji wirusa. Analiza 24 681 par sekwencji aminokwasów HA wirusów H1N1pdm2009 i ich wieku pacjentów wykazała, że empiryczne prawdopodobieństwo fiksacji nowych aminokwasów na HA różniło się istotnie w zależności od ich częstości w populacji, rozkładu wieku pacjentów i flag epitopów. Selektywną przewagę wariantu szczepu posiadającego nowy aminokwas modelowano za pomocą liniowych kombinacji rozkładów wieku pacjentów i flag epitopów, a następnie modelowano prawdopodobieństwo fiksacji nowego aminokwasu za pomocą wzoru Kimury dla korzystnej selekcji.
Parametry modeli oszacowano na podstawie danych sekwencyjnych, a modele przetestowano za pomocą czterokrotnych walidacji krzyżowych. Sama częstotliwość nowych aminokwasów może osiągnąć wysoką czułość, specyficzność i precyzję w przewidywaniu fiksacji nowego aminokwasu, którego częstotliwość jest większa niż 0,11. Sugerowany szacowany parametrże wirusy z nowym aminokwasem o częstości występowania w populacji większej niż 0,11 mają znacznie większą przewagę selekcyjną w porównaniu z wirusami ze starym aminokwasem w tej samej pozycji. Model uwzględniający wartość Z sum rang pacjentów według wieku nowych aminokwasów przewidywał podstawienia aminokwasów w HA z czułością 0,78, swoistością 0,86 i precyzją 0,83, wykazując znaczną poprawę w porównaniu z modelem stałej przewagi selektywnej, który używał tylko częstotliwości aminokwasu.
Wyniki te sugerują, że wirusy H1N1 mają tendencję do selekcji w dorosłej populacji, a częstość wirusów posiadających nowe aminokwasy i wiek ich pacjentów są przydatne do przewidywania podstawień aminokwasów w HA.
Wirus grypy H1N1 jest znany na całym świecie jako poważne zagrożenie pandemiczne.
Szczepienia to jedna z najskuteczniejszych metod ochrony przed tym wirusem i sposób na zmniejszenie ryzyka pandemii sezonowej. Komercyjna szczepionka nie reaguje odpowiednio na szczepy pandemiczne. W badaniu tym zbadano potencjalną funkcję sformułowanej hemaglutyniny H1N1 z adiuwantem MF59 przeciwko A/PR/8/34 (H1N1). W tym celu zaprojektowano rekombinowany gen hemaglutyniny (rHA) wirusa grypy A i poddano ekspresji w komórce SF9 przez system ekspresji bakulowirusa. Cztery grupy myszy immunizowano tylko rHA w połączeniu z MF59, adiuwantem ałunu i tylko rozszczepionym wirusem.
Immunizowane myszy następnie wykorzystano do humoralnego testu odpornościowego, a wyniki porównano z myszami nieleczonymi (grupa negatywna). Poza tym, zarówno leczone, jak i kontrolne grupy myszy prowokowano wirusem grypy przystosowanym do myszy A/PR/8/34(H1N1) przez kroplę donosową. Oceniono masę ciała, przeżycie, zmienność temperatury i stan medyczny próbek. Myszy immunizowane rekombinowanym białkiem wykazywały odpowiedź humoralną na wirusa grypy A. W przypadku prowokacji wirusem, jednoczesne podawanie rHA z adiuwantem MF59 może prowadzić do 92% przeżycia zaszczepionychmyszy w ciągu 10 dni. Grupa leczona MF59 wykazała niewielką utratę wagi i wysoką temperaturę ciała dwa tygodnie po infekcji. Grupa ta wykazywała również wyższe miano przeciwciał hamujących hemaglutynację (HI) w porównaniu z grupą zaszczepioną podziałem wirusa i adiuwantem ałunu.
Rabbit Anti-Hemagglutinin Influenza A Virus H1N1 H1 (Pan H1N1 reacts with multiple strains of H1N1) IgG, purified |
|||
H1N1-02-A | Alpha Diagnostics | 100 ul | 578.4 EUR |
Rabbit Anti-Hemagglutinin Influenza A Virus H1N1 H1 (H1N1) (A/New Caledonia/20/99) IgG |
|||
H1N1-01-A | Alpha Diagnostics | 100 ul | 578.4 EUR |
Influenza A Virus Subtype H1N1 Hemagglutinin (H1N1 Hemagglutinin) Antibody |
|||
abx411428-02mg | Abbexa | 0.2 mg | 678 EUR |
Recombinant Purified Hemagglutinin Influenza A Virus H1N1 H1 (H1N1) (A/New Caledonia/20/99) protein control for Western |
|||
H1N1-01-C | Alpha Diagnostics | 100 ul | 343.2 EUR |
Recombinant (HEK) Purified Hemagglutinin Influenza A Virus H1N1 H1 (H1N1) (A/New Caledonia/20/99) protein (>95%, his-tag) |
|||
H1N1-01-R-10 | Alpha Diagnostics | 10 ug | 343.2 EUR |
Recombinant Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 California 04/2009 |
|||
7-07873 | CHI Scientific | 2µg | Ask for price |
Recombinant Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 California 04/2009 |
|||
7-07874 | CHI Scientific | 10µg | Ask for price |
Recombinant Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 California 04/2009 |
|||
7-07875 | CHI Scientific | 100µg | Ask for price |
Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 California 04 / 2009 Protein |
|||
20-abx260020 | Abbexa |
|
|
Recombinant Hemagglutinin Influenza A Virus H1N1 California/06/2009 |
|||
RP-645 | Alpha Diagnostics | 2 ug | 196.8 EUR |
Recombinant Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 New Caledonia 20/99 |
|||
7-07867 | CHI Scientific | 2µg | Ask for price |
Recombinant Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 New Caledonia 20/99 |
|||
7-07868 | CHI Scientific | 10µg | Ask for price |
Recombinant Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 New Caledonia 20/99 |
|||
7-07869 | CHI Scientific | 100µg | Ask for price |
Recombinant Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 Solomon Island 03/2006 |
|||
7-07870 | CHI Scientific | 2µg | Ask for price |
Recombinant Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 Solomon Island 03/2006 |
|||
7-07871 | CHI Scientific | 10µg | Ask for price |
Recombinant Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 Solomon Island 03/2006 |
|||
7-07872 | CHI Scientific | 100µg | Ask for price |
Influenza A (Swine H1N1) Hemagglutinin (A/California/14/2009) Peptide |
|||
11-555 | ProSci | 0.05 mg | 632.4 EUR |
Influenza A Hemagglutinin H1 (A/Brisbane/59/2007)(H1N1) Peptide |
|||
11-563 | ProSci | 0.05 mg | 632.4 EUR |
Influenza A Hemagglutinin H1 (A/Brisbane/59/2007)(H1N1) Peptide |
|||
11-564 | ProSci | 0.05 mg | 632.4 EUR |
Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 New Caledonia 20 / 99 Protein |
|||
20-abx260014 | Abbexa |
|
|
Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 New York 3571 / 2009 Protein |
|||
20-abx260022 | Abbexa |
|
|
Hemagglutinin-Influenza A Virus H1N1 Solomon Island 03 / 2006 Protein |
|||
20-abx260025 | Abbexa |
|
|
Influenza A (H1N1) Antigen |
|||
11-553 | ProSci | 1 mL | 645 EUR |
Influenza A antibody (H1N1) |
|||
20C-CR1233GP | Fitzgerald | 1 ml | 511.2 EUR |
Influenza A antibody (H1N1) |
|||
20-IG23 | Fitzgerald | 1 mg | 139.2 EUR |
Influenza A H1N1 antibody |
|||
10R-7791 | Fitzgerald | 50 ug | 678 EUR |
Influenza-A H1N1 Antibody |
|||
20-abx137503 | Abbexa |
|
|
Influenza-A H1N1 Antibody |
|||
20-abx137508 | Abbexa |
|
|
Influenza A (H1N1) Protein |
|||
abx061588-1ml | Abbexa | 1 ml | 794.4 EUR |
Influenza A H1N1 Antibody |
|||
abx023045-100ug | Abbexa | 100 ug | 1011.6 EUR |
Influenza A H1N1 Antibody |
|||
abx023046-100ug | Abbexa | 100 ug | 961.2 EUR |
Influenza A H1N1 Antigen |
|||
abx670268-1ml | Abbexa | 1 ml | 627.6 EUR |
Influenza A Virus Subtype H1N1 (H1N1) Antibody |
|||
abx415737-01ml | Abbexa | 0.1 ml | 961.2 EUR |
Influenza A Virus Subtype H1N1 (H1N1) Antibody |
|||
abx411425-1ml | Abbexa | 1 ml | 610.8 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5231-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5231-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Peptide |
|||
5231P | ProSci | 0.05 mg | 197.7 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5233-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5233-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Peptide |
|||
5233P | ProSci | 0.05 mg | 197.7 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5235-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5235-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Peptide |
|||
5235P | ProSci | 0.05 mg | 197.7 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5237-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5237-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Peptide |
|||
5237P | ProSci | 0.05 mg | 197.7 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5239-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5239-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Peptide |
|||
5239P | ProSci | 0.05 mg | 197.7 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5241-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
5241-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Peptide |
|||
5241P | ProSci | 0.05 mg | 197.7 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
24917-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
24918-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
24919-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
24920-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
24921-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody |
|||
24922-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Recombinant (HEK) Influenza A H1N1 HA protein (A/California/07/2009 (H1N1), ?TM 18-529 aa, 70-75 kda, >95%, his-tag) |
|||
H1N1-03-R-10 | Alpha Diagnostics | 10 ug | 343.2 EUR |
Recombinant (HEK) Influenza A H1N1 HA protein (A/California/07/2009 (H1N1), ?TM 18-529 aa, 70-75 kda, >95%, his-tag) |
|||
H1N1-03-R-100 | Alpha Diagnostics | 100 ug | 927.6 EUR |
Influenza A Virus Subtype H1N1 (H1N1) Antibody (HRP) |
|||
abx411426-1ml | Abbexa | 1 ml | 760.8 EUR |
Influenza A antibody (H1N1) (HRP) |
|||
60-I30 | Fitzgerald | 1 ml | 556.8 EUR |
Influenza A antibody (H1N1) (FITC) |
|||
60-I32 | Fitzgerald | 1 ml | 440.4 EUR |
Influenza A antibody (H1N1) (FITC) |
|||
60C-CR1233GF | Fitzgerald | 1 ml | 649.2 EUR |
Influenza A H1N1 protein (Taiwan) |
|||
30R-AI038 | Fitzgerald | 1 mg | 1747.2 EUR |
Influenza A H1N1 protein (Beijing) |
|||
30R-AI039 | Fitzgerald | 1 mg | 1747.2 EUR |
Influenza A H1N1 HA1 antibody |
|||
10R-7995 | Fitzgerald | 100 ug | 386.4 EUR |
Influenza A H1N1 Virions Antibody |
|||
abx023051-1ml | Abbexa | 1 ml | 718.8 EUR |
Influenza А H1N1 PCR kit |
|||
PCR-H442-48R | Bioingentech | 50T | 987.6 EUR |
Influenza А H1N1 PCR kit |
|||
PCR-H442-96R | Bioingentech | 100T | 1335.6 EUR |
QPCR Kit RNA H1N1 influenza |
|||
MOL6930 | Scientific Laboratory Supplies | EACH | 1220.94 EUR |
Influenza A Virus (subtype H1N1) |
|||
RA19071 | Neuromics | 100 ul | 568.8 EUR |
Influenza A Hemagglutinin antibody |
|||
70R-12190 | Fitzgerald | 100 ug | 483.6 EUR |
Avian Influenza Hemagglutinin Antibody |
|||
3425-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Avian Influenza Hemagglutinin Antibody |
|||
3425-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Avian Influenza Hemagglutinin Peptide |
|||
3425P | ProSci | 0.05 mg | 197.7 EUR |
Avian Influenza Hemagglutinin Antibody |
|||
3427-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Avian Influenza Hemagglutinin Antibody |
|||
3427-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Avian Influenza Hemagglutinin Peptide |
|||
3427P | ProSci | 0.05 mg | 197.7 EUR |
Avian Influenza Hemagglutinin Antibody |
|||
24276-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Avian Influenza Hemagglutinin Antibody |
|||
24277-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Influenza Hemagglutinin (HA) Peptide |
|||
A6004-25 | ApexBio | 25 mg | 633.6 EUR |
Influenza Hemagglutinin (HA) Peptide |
|||
A6004-5 | ApexBio | 5 mg | 201.6 EUR |
Influenza Hemagglutinin (HA) Peptide |
|||
A6004-5.1 | ApexBio | 10 mM (in 1mL DMSO) | 560.4 EUR |
Influenza Virus Hemagglutinin Antibody |
|||
abx415742-01mg | Abbexa | 0.1 mg | 944.4 EUR |
Influenza A Hemagglutinin protein |
|||
80-1405 | Fitzgerald | 100 ug | 3010.8 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Monoclonal Antibody |
|||
26042-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Monoclonal Antibody |
|||
26043-100ul | SAB | 100ul | 468 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody [7H12F6] |
|||
PM-5533-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Seasonal H1N1 Hemagglutinin Antibody [7H12F6] |
|||
PM-5533-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody [3E9H5] |
|||
PM-5535-002mg | ProSci | 0.02 mg | 206.18 EUR |
Swine H1N1 Hemagglutinin Antibody [3E9H5] |
|||
PM-5535-01mg | ProSci | 0.1 mg | 523.7 EUR |
Influenza A H1N1 protein (New Caledonia) |
|||
30R-AI040 | Fitzgerald | 1 mg | 1747.2 EUR |
Influenza A H1N1 Virions Antibody (Biotin) |
|||
abx023048-1ml | Abbexa | 1 ml | 710.4 EUR |
Influenza A H1N1 Virions Antibody (HRP) |
|||
abx023049-1ml | Abbexa | 1 ml | 718.8 EUR |
Influenza A H1N1 Virions Antibody (FITC) |
|||
abx023050-1ml | Abbexa | 1 ml | 777.6 EUR |
Influenza А H1N1 RT PCR kit |
|||
RTq-H442-100R | Bioingentech | 100T | 1573.2 EUR |
Influenza А H1N1 RT PCR kit |
|||
RTq-H442-150R | Bioingentech | 150T | 2144.4 EUR |
Influenza А H1N1 RT PCR kit |
|||
RTq-H442-50R | Bioingentech | 50T | 1155.6 EUR |
Recombinant (HEK) Influenza A HA1 protein (A/California/07/2009 (H1N1; 18-345 aa,55-60 kda, >95%, his-tag) |
|||
H1N1-02-R-10 | Alpha Diagnostics | 10 ug | 343.2 EUR |
Podsumowując, wyniki wykazały, że rekombinowane białko z adiuwantem MF59 zapewniało lepsze bezpieczeństwo niż adiuwant ałunowy, dzięki czemu można je uznać za bezpieczną i niezawodną szczepionkę przeciwko wirusowi H1N1 do dalszych badań