Homeofarm – Bulk Biotech Lab Suppliers

Standardowe testy dla koronawirusa 2 zespołu ostrej ostrej niewydolności oddechowej (SARS-CoV-2) wykrywają obecność wirusowego RNA za pomocą PCR w czasie rzeczywistym z odwrotną transkrypcją (rRT). Ostatnio opracowano wygodne, szybkie i stosunkowo niedrogie metody wykrywania antygenu SARS-CoV-2 (Ag). Test STANDARD Q COVID-19 Ag (SD Biosensor, Inc., Suwon, Korea) to szybki test immunochromatograficzny, który jakościowo wykrywa białko nukleokapsydu SARS-CoV-2 przy użyciu przeciwciał sprzężonych ze złotem. Oceniliśmy jego działanie w porównaniu z testem Allplex 2019-nCoV (Seegene, Seul, Korea) w retrospektywnym badaniu kliniczno-kontrolnym z wykorzystaniem próbek resztkowych.

Czułość i swoistość testu STANDARD Q COVID-19 Ag wyniosła odpowiednio 89,2% (58/65) i 96,0% (96/100). Wartości progowe cyklu (Ct) dla trzech docelowych genów SARS-CoV-2 (otoczki, zależnej od RNA polimerazy RNA i genów nukleokapsydowych) uwzględnionych w teście Allplex 2019-nCoV były znacznie niższe u pacjentów z dodatnim wynikiem testu Ag niż w teście Ag- pacjenci ujemni ( p <0,001). Czułość testu Ag była wyższa w próbkach z Ct≤30 i pobranych od jednego do pięciu dni po wystąpieniu objawów. Podsumowując, test STANDARD Q COVID-19 Ag może służyć jako alternatywa w warunkach wysokiego rozpowszechnienia, gdy niska czułość jest kompensowana lub gdy testy rRT-PCR są ograniczone.

Oceniliśmy dokładność diagnostyczną dwóch nowo opracowanych, przyłóżkowych, szybkich testów antygenowych (RAT) do wykrywania SARS-CoV-2, AFIAS COVID-19 Ag i ichromaTM COVID-19 Ag oraz zbadaliśmy kinetykę antygenu.

Przeanalizowano łącznie 200 seryjnie pobranych próbek z nosogardła (NP) od 38 pacjentów z COVID-19 i 122 próbki z kontroli negatywnych. Czułość i swoistość diagnostyczną oceniono w porównaniu z wynikami testów molekularnych i podzielono według docelowych genów (E, RdRP i N) oraz dni po wystąpieniu objawów (PSO).

• Do oceny kinetyki zastosowano wskaźniki odcięcia z seryjnych próbek NP zgodnie z liczbą dni PSO. Oba RAT wykazały czułość 91,3‒100% dla próbek z progiem cyklu (Ct) <25. Swoistość AFIAS wynosiła 98,7‒98,9%, a ichromaTM 100,0%. Wartości kappa AFIAS i ichromaTM do badań molekularnych próbek o Ct < 25 (RdRP) wyniosły odpowiednio 0,97 i 1,00.
• Czułość AFIAS i ichromaTM dla wszystkich genów była niższa dla próbek pobranych przy 8-14 PSO niż dla tych zebranych przed 7-dniowym PSO. Profile kinetyki wykazały, że poziomy antygenu stopniowo spadały z ≤7-dniowego PSO do >22-dniowego PSO. Oba RAT wykazały doskonałą swoistość i akceptowalną czułość w przypadku próbek NP o wyższym mianowaniu wirusa oraz próbek pobranych w ciągu 7 dni od PSO.
• W związku z tym mogą stać się użytecznymi narzędziami do wczesnego wykrywania SARS-CoV-2. Jednak ze względu na obawy dotyczące fałszywie ujemnego wyniku RAT należy stosować w połączeniu z testami molekularnymi.
• Ultraczuły szybki test diagnostyczny Alere Plasmodium falciparum  Malaria Ag bogaty w histydynę 2 (Alere uRDT) to nowe narzędzie diagnostyczne, które jest droższe niż inne szybkie testy diagnostyczne malarii (RDT) stosowane rutynowo w klinikach w Ugandzie.
• Producent zaleca testowanie próbek w ciągu 2 dni i ocenianie wyników po 20 minutach, co może być niepraktyczne w klinikach o dużej objętości i ubogich w zasoby. Porównaliśmy testy za pomocą szybkiego testu diagnostycznego Alere Ag (uRDT), CareStart RDT, mikroskopii i ultraczułej ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkrypcją I8S rRNA (qRT-PCR) przy użyciu próbek ankietowych i klinicznych. W przypadku Alere uRDT wykorzystaliśmy ankietowe próbki krwi przechowywane w temperaturze 4°C przez 44 dni, a niektóre próbki kliniczne celowo zmierzyliśmy wyniki powyżej 20 minut.
• Testy Alere uRDT i qRT-PCR zidentyfikowały bezobjawowe przypadki parazytemii odpowiednio w 56% i 72% próbek ankietowych, które zostały pierwotnie ocenione jako ujemne przez CareStart RDT. Stosując qRT-PCR jako złoty standard, Alere uRDT przewyższał CareStart RDT w szacowaniu bezobjawowej częstości występowania pasożytów w badaniu przekrojowym ( p  = 0,007) oraz w wykrywaniu klinicznie istotnej malarii; obie RDT były porównywalne w wykrywaniu bezobjawowej parazytemii w klinice ( p  = 0,599). Punktacja wyników Alere uRDT po 20 minutach dała ważne wyniki potwierdzone przez CareStart RDT, ale istniało spójne tło; ocena Alere uRDT powyżej 20 minut dała wyniki fałszywie dodatnie.
• Alere uRDT przewyższał CareStart RDT w badaniu terenowym w szacowaniu częstości występowania malarii oraz w klinice objawowej choroby malarii. Dało wiarygodne wyniki przy użyciu próbek przechowywanych w temperaturze 4°C przez 44 dni, ale wyniki testu odczytane dłużej niż 20 minut były nieważne.

W placówkach o ograniczonych zasobach lub w placówkach opieki, szybkie testy diagnostyczne (RDT), które mają na celu jednoczesne wykrywanie przeciwciał HIV i antygenu kapsydu p24 (p24CA) z wysoką czułością, mogą stanowić ważną alternatywę dla badań przesiewowych pod kątem wczesnych infekcji.

Oceniliśmy działanie przeciwciał i składników antygenowych starej i nowej wersji RDTs Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo RDTs równolegle z oznaczeniami ilościowymi w teście immunologicznym antygen/przeciwciało czwartej generacji (4G-EIA), antygen p24CA test immunologiczny (p24CA-EIA), immunobloty i kwantyfikacja kwasów nukleinowych. Uwzględniliśmy próbki osocza ostrych, nieleczonych wcześniej zakażeń HIV-1 (stadia Fiebiga I-VI, podtypy A1, B, C, F, CRF02_AG, CRF02_AE, URF) lub przewlekłych zakażeń HIV-1 i HIV-2. Składnik antygenowy testu został również oceniony dla panelu wirusów HIV-1 przeniesionych/założycieli (T/F) podtypu B, szczepów HIV-2 i pierwotnych izolatów HIV-2.

Ponadto oceniliśmy czułość analityczną RDT w wykrywaniu p24CA przy użyciu wysoce oczyszczonego standardu p24CA HIV-1 _NL4-3  . Odkryliśmy, że 77% próbek osocza pobranych od pacjentów z ostrym zakażeniem, immunoblot-ujemnych pacjentów z HIV-1 w stadiach II-III Fiebiga zostało zidentyfikowanych przez nowy RDT, podczas gdy tylko 25% uzyskało wynik pozytywny w starym RDT. Obydwa RDT reagowały na wszystkie próbki od pacjentów przewlekle zakażonych HIV-1 i ostro zakażonych HIV-1 z pozytywnym wynikiem immunoblottingu. Wszystkie próbki od przewlekle zakażonych pacjentów z HIV-2 uzyskały wynik dodatni w nowej RDT. Warto zauważyć, że czułość RDT w wykrywaniu zrekombinowanego p24CA z wirusa podtypu B wahała się między 50 a 200 pg/ml, odzwierciedlona również w wykrywaniu wirusów HIV-1 T/F tylko przy stężeniach antygenów dziesięciokrotnie wyższych niż sugerowane przez producenta . RTD nie rozpoznał żadnego z testowanych wirusów HIV-2.

Nasze wyniki wskazują, że nowa wersja Determine™ HIV-1/2 Ag/Ab Combo wykazuje zwiększoną czułość w wykrywaniu próbek osocza HIV-1 p24CA-dodatnich i immunoblot-ujemnych w porównaniu z wersją prekursorową. Czułość 4G-EIA i p24CA-EIA w wykrywaniu głównego strukturalnego antygenu HIV, a tym samym w diagnozowaniu ostrych infekcji przed serokonwersją, jest nadal wyższa.

Obecne szybkie testy diagnostyczne malarii (RDT) zawierają przeciwciała przeciwko  bogatemu w histydynę białku 2 bogatemu w histydynę (PfHRP2) specyficznemu  dla Plasmodium falciparum ,  dehydrogenazie mleczanowej Plasmodium (pLDH) i aldolazie w różnych kombinacjach.

Niskie lub wysokie gęstości pasożytów/docelowe stężenia antygenów mogą wpływać na dokładność i czułość RDT wykrywających PfHRP2. Przeanalizowaliśmy skuteczność SD Bioline Malaria Ag Pf/Pan RDT w odniesieniu do  parazytemii P. falciparum  na Madagaskarze, gdzie kliniczna  malaria Plasmodium vivax  występuje obok  P. falciparum . Dziewięćset sześćdziesiąt trzy próbki od pacjentów szukających opieki z powodu podejrzenia zakażenia malarią przeanalizowano za pomocą RDT, mikroskopii i  specyficznego dla gatunku Plasmodium  testu z wykrywaniem ligazy i fluorescencyjnego testu mikrosferowego (LDR-FMA).

Dodatni wynik zakażenia Plasmodium  w tej diagnostyce wyniósł odpowiednio 47,9%, 46,9% i 58%. Dominowały wyłącznie zakażenia Plasmodium falciparum (mikroskopia 45,7%; LDR-FMA 52,3%). W sumie 16,3%  P. falciparum , 70%  P. vivax i wszystkie  zakażenia Plasmodium malarii ,  Plasmodium ovale i mieszanych gatunków były submikroskopowe. W 423  zakażeniach P. falciparum  mono, potwierdzonych mikroskopowo i metodą LDR-FMA, parazytemia u osób z dodatnim wynikiem zarówno dla prążków PfHRP2 jak i pan-pLDH była znacznie wyższa niż u osób z dodatnim wynikiem tylko dla prążka PfHRP2 ( P  < 0,0001). Plasmodium falciparum parazytemię u tych, które zostały wykryte jako  P.

falciparum – tylko infekcje mikroskopowe, ale  infekcje mieszane P. falciparum  przez LDR-FMA również wykazywały podobne wyniki przy dodatnim wyniku prążka RDT. Ponadto, aby potwierdzić tę obserwację, użyliśmy różnych parazytemii (3-0,0001%) utrzymywanego w laboratorium szczepu 3D7. Dodatni prążek pLDH u osobników z wysokim  zakażeniem P. falciparum może skomplikować diagnostykę i leczenie, szczególnie gdy mikroskopia nie pozwala na stwierdzenie  P. vivax , a te dwie infekcje wymagają różnych metod leczenia.